Análisis del polimorfismo del gen GSTP1 y de los patrones de metilación de los genes RASSF1, RARβ, GSTP1, APC y CDH1 como posibles biomarcadores en cáncer de próstata en una población de pacientes de Antioquia

Abstract

RESUMEN: El cáncer de próstata es una de las principales causas de muerte en hombres a nivel mundial. Dadas sus características biológicas y las dificultades para su detección temprana, se hace necesario encontrar nuevos biomarcadores que permitan una detección más eficaz con la finalidad de disminuir los índices de mortalidad. En este trabajo se analizaron los patrones de metilación de cinco genes APC, GSTP1, CDH1, RASSF1a y RARβ que están involucrados en diferentes etapas del desarrollo de esta enfermedad. Dado que la enzima GSTP1 es una de las más importantes en el transcurso de la enfermedad, también se determinó un polimorfismo que consiste en el cambio de una A por G en el nucleótido 313 y que resulta en una substitución (Ile105Val) en el sitio de unión al substrato de la GSTP1 que reduce la actividad catalítica de esta enzima. La comparación entre los patrones de metilación y el polimorfismo se realizó en 96 muestras de biopsias de la IPS Universitaria con diagnóstico de adenocarcinoma, hiperplasia o tejido benigno (normal). En este estudio se estandarizaron tres protocolos de extracción de ADN de muestras de orina y biopsia. En los pacientes diagnosticados con adenocarcinoma se encontró la frecuencia más alta de genes metilados en comparación con los pacientes que tenían hiperplasia benigna de próstata y tejido normal, siendo el gen de la GSTP1 el que presentaba la frecuencia más alta de metilación (38%), para estos pacientes. El 90% de los pacientes con adenocarcinoma eran heterocigotos (ile/val) para la enzima GSTP1. En conclusión, este estudio permitió la estandarización de métodos específicos de extracción de ADN a partir de biopsias embebidas en parafina y de muestras de orina, además, la utilización de biomarcadores útiles en el diagnóstico temprano del cáncer de próstata. Palabras clave: Adenocarcinoma, hiperplasia, bioindicador, epigenética, PSA.

ABSTRACT: Prostate cancer is a leading cause of death in men worldwide. Given their biological characteristics and difficulties in early detection, it is necessary to find new biomarkers to achieve a more effective detection in order to reduce mortality rates. In this paper we analyzed the methylation patterns of five genes APC, GSTP1, CDH1, RASSF1A and RARβthat are involved in different development stages of of this disease. Since the enzyme GSTP1 is one of the most important in the course of this disease, we also determined a polymorphism in the enzyme that consist in a change of A to G at nucleotide 313, resulting in a substitution (Ile105Val) at the site of substrate binding GSTP1, reducing the catalytic activity of this enzyme. Comparisons of the methylation patterns and the polymorphism was performed on 96 samples of prostate biopsies from the Universitary IPS diagnosed with adenocarcinoma, benign hyperplasia, or benign tissue (normal). In this study three protocols for DNA extraction were standardized from urine and biopsy. In patients diagnosed with adenocarcinoma was found the highest frequency of methylated genes compared to patients with benign prostatic hyperplasia and normal tissue, the GSTP1 gene had the highest frequency of methylation (38%), for these patients. 90% of patients with adenocarcinoma were heterozygous (ile / val) for the enzyme GSTP1. In conclusion, this study allowed standardization of specific methods of DNA extraction from paraffin embedded biopsy and urine samples as well, the use of biomarkers is useful in the early diagnosis of prostate cancer. Keywords: adenocarcinoma, hyperplasia, biomarker, epigenetic, PSA.