Análisis morfológico y molecular evidencia problemas al identificar Anopheles nuneztovari (Diptera: Culicidae) por claves dicotómicas

Abstract

RESUMEN : El Grupo Oswaldoi, subgénero Nyssorhynchus (Diptera: Culicidae), incluye 16 especies. Algunas de estas especies presentan una alta variabilidad morfológica intraespecífica y similitud interespecie; lo anterior puede ocasionar dificultad en la identificación de la hembra al usar las claves morfológicas, como ocurre con Anopheles nuneztovari, considerado vector primario de malaria en Colombia. En este trabajo se comparó la utilidad de cinco claves morfológicas para la identificación de especímenes A. nuneztovari recolectados en la localidad de Puerto Anchica, Montelibano, Córdoba, Colombia. Se analizaron tres relaciones morfométricas y se confirmó la identificación morfológica utilizando la técnica PCR-RFLP basada en secuencias ITS2. El análisis de 41 hembras usando las claves, mostró que los especímenes A. nuneztovari presentaron sobrelapamiento morfológico con otras especies del Grupo Oswaldoi, como: A. rangeli, A. oswaldoi, A. evansae y A. benarrochi. El análisis molecular confirmó que todos los especímenes corresponden a A. nuneztovari. Dado que el uso de claves morfológicas continúa siendo la estrategia de elección para la identificación de anofelinos, los resultados sugieren que en caso de especies problemáticas, es conveniente confirmar la identificación mediante herramientas moleculares desarrolladas con el respaldo de la identificación de estadios inmaduros.

ABSTRACT : The Oswaldoi Group, subgenus Nyssorhynchus (Diptera: Culicidae), includes 16 species. Some of these species exhibit high intraspecific morphological variability and interspecific similarity; this can lead to difficulty in the identification of females by using morphological keys, as is the case with Anopheles nuneztovari, considered a primary malaria vector in Colombia. In this study we compared the usefulness of five morphological keys for the identification of A. nuneztovari specimens collected in the locality of Puerto Anchica, Montelibano, Córdoba, Colombia. Three morphometric ratios were analyzed and morphological identification results were confirmed using the PCR-RFLP technique based on ITS2 sequences. The analysis of 41 females using the keys showed that A. nuneztovari specimens presented overlap with other species of the Oswaldoi Group, such as A. rangeli, A. oswaldoi, A. evansae and A. benarrochi. Molecular analysis confirmed that all of the specimens corresponded to A. nuneztovari. Because the use of morphological keys continue to be a strategy of choice for the identification of anophelines, the results suggest that in the case of problematic species, it is convenient to confirm identification using molecular methods developed with the support of the identification of immature stages.