Pirosecuenciación del Genoma de una Cepa Andina de Potato Virus S (PVS, Carlavirus) Infectando Solanum phureja (Solanaceae) en Colombia

Abstract

RESUMEN: El Potato virus S (PVS) es uno de los virus prevalentes en los cultivos de papa del mundo. En Colombia este virus es de los más incidentes en diferentes variedades de S. tuberosum subsp. andigena y S. phureja. Estudios previos basados en análisis de secuencias del gen de la cápside viral (CP) de aislamientos colombianos de PVS, detectaron la presencia de las dos razas del patógeno (PVSO y PVSA), así como un alto nivel de variación entre aislamientos de PVSA. En esta investigación se secuenció el 98% (8330 nt) del genoma de la cepa RL5 de PVS obtenida a partir de una planta naturalmente infectada de S. phureja var. Criolla Colombia en el municipio de La Unión (Antioquia). Para esto se realizó una pirosecuenciación del ADNc obtenido a partir del ARNm de dicha planta, utilizando el sistema 454 Life Sciences (Roche). El genoma del aislamiento RL5 de PVSA (Número de Accesión JX683388) fue ensamblado a partir de un total de 10899 reads, con una profundidad promedio de 470.8 y resultó filogenéticamente relacionado con la cepa BB-AND de PVSA de Brasil, con la que compartió una identidad genética del 94%. Un análisis de agrupamiento basado en el gen CP, permitió identificar a dicha cepa como perteneciente al clado III de PVSA. La información de este genoma puede ser utilizada para el diseño de cebadores y sondas específicas que apoyen los programas de certificación de tubérculo-semilla y manejo del PVS en Colombia.

ABSTRACT: Potato virus S (PVS) is one of the most prevalent viruses in potato crops around the world. In Colombia, PVS has been shown to be one of the viruses with highest incidence in varieties of S. tuberosum subsp. andigena and S. phureja. Previous sequence analysis of the CP gene from colombian isolates, detected the presence of two PVS strains, PVSO y PVSA, and a high variation within PVSA isolates. In this work, we report 98% (8330 nt) of the genome sequence of PVS isolate RL5 obtained from a naturally infected plant of S. phureja var. Criolla Colombia collected at the municipality of La Unión (Antioquia). The sequence was obtained by pyrosequencing a cDNA library from the infected plant using a 454 Life Sciences sequencer (Roche). The genome of isolate RL5 (Accession number JX683388) was assembled from a total of 10899 reads with an average depth of 470.8 nt and shares 94% identity to strain BB-AND (PVSA) from Brazil. Cluster analysis using the CP gene assigns this novel strain to clade III of PVSA. This genomic information can be used for the design of specific primers and probes that support tuber-seed certification and PVS control programs in Colombia.