Estandarización y validación de métodos de extracción y amplificación de ADN para tejidos mineralizados : restos óseos y piezas dentales

Abstract

RESUMEN: El papel de los laboratorios forenses en la identificación de víctimas es esencial por razones humanitarias, pero también para las investigaciones civiles o penales y para lograr la individualización de un cadáver; para éste propósito se apoyan en diferentes metodologías, que se emplean de forma interdisciplinaria a través de ciencias como la antropología, la odontología, la dactiloscopia, la radiología y/o la genética forense, entre otras; pues en los casos donde no es posible realizar la identificación del cuerpo a través de los métodos clásicos, es necesario recurrir al análisis de ADN proveniente de fuentes poco “convencionales” como huesos o piezas dentales. Validar los métodos de extracción de ADN ante el ONAC, es un requisito para los laboratorios que buscan prestar servicios de filiación e identificación humana. En IdentiGEN, se realizó la estandarización y validación del método QIAaquick PCR Purification Kit -QIAGEN para su uso en tejidos mineralizados. Se hicieron ensayos de extracción, cuantificación, amplificación de ADN y electroforesis capilar para asegurar la eficacia del método. Se tipificaron de manera exitosa las piezas dentales y fragmentos de hueso utilizados, obteniendo perfiles de alta calidad y confiabilidad, que soportan la eficacia y exactitud del método para su uso previsto.

ABSTRACT: The role of forensic laboratories in the identification of victims is essential for humanitarian reasons, but also for civil or criminal investigations and to achieve the individualization of a corpse; for this purpose they rely on different methodologies, which are used in an interdisciplinary way through sciences such as anthropology, dentistry, dactyloscopy, radiology and/or forensic genetics, among others; but in cases where it is not possible to identify the body through classical methods, DNA analysis from unconventional sources such as bones or teeth is necessary. Validation of DNA extraction methods by ONAC is a requirement for laboratories seeking to provide human identification and affiliation services. In IdentiGEN, the standardization and validation of the QIAaquick PCR Purification Kit -QIAGEN method was performed for use in mineralized tissues. Extraction, quantification, DNA amplification and capillary electrophoresis tests were performed to ensure the efficacy of the method. The dental parts and bone fragments used were successfully typified, obtaining profiles of high quality and reliability, which support the efficiency and accuracy of the method for its intended use.