Molecular detection of Eastern Equine Encephalitis virus in mosquitoes from La Pintada (Antioquia)

Abstract

RESUMEN: Objetivo. La detección de arbovirus emergentes y re-emergentes a partir de mosquitos provenientes de áreas semi-urbanas y rurales es fundamental para predecir posibles eventos epidémicos en poblaciones humanas. En el municipio de La Pintada (Departamento de Antioquia), caracterizado por la presencia de remanentes de bosque seco tropical, actividades de pesca, turismo, explotación agropecuaria y minera, se realizó un estudio entomológico para explorar la posible presencia y circulación de arbovirus de importancia en salud pública. Materiales y Métodos. Los mosquitos adultos fueron recolectados en sitios urbanos y rurales en febrero-abril del año 2012. Los especímenes colectados fueron almacenados en tanques de nitrógeno líquido, y luego separados en grupos utilizando claves taxonómicas para género. Para la detección de los virus se realizó extracción de RNA y RT-PCR genérica/anidada para los géneros Flavivirus, Alphavirus, Orthobunyavirus (Grupo Bunyamwera) y Phlebovirus. Resultados. 1274 mosquitos adultos e inmaduros fueron colectados, pertenecientes en su mayoría a los géneros Culex y Aedes. Los extractos de RNA de 64 pools fueron evaluados por RT-PCR. Se encontró un pool positivo para Alphavirus. La secuenciación de los productos de RT-PCR y el análisis con secuencias depositadas en GenBank indica la presencia del virus de Encefalitis Equina del Este (EEEV). Conclusiones. Este es el primer registro de infección natural del virus de encefalitis equina del este (EEEV) en mosquitos de La Pintada (Antioquia, Colombia), un área con factores ecológicos aptos para la emergencia y re-emergencia de arbovirus de importancia veterinaria y médica.

ABSTRACT: Objective. The detection of emerging and re-emerging arboviruses in mosquitoes from urban and rural areas, is fundamental for predict possible epidemic outbreaks in human populations. The Municipality of La Pintada (Antioquia), is characterized by the presence of dry tropical forest relicts, fishing, tourism, farms and mining. An entomological research was performed for explore the possible circulation of arboviruses of public health importance. Materials and methods. Mosquitoes were captured in urban and rural sites in February-April of 2012. The specimens were stored in liquid nitrogens tanks and were grouped using taxonomic keys for genera. RNA extraction from pools and generic/nested RT-PCR was performed for Flavivirus, Alphavirus, Orthobunyavirus (Group Bunyamwera) and Phlebovirus. Results. 1274 mosquitoes were collected, mainly belonging to Culex and Aedes genera. RNA extracts of 64 pools were tested by RT-PCR and one pool was positive for Alphavirus. Sequencing of the RT-PCR product and the analysis with sequences storage in GenBank designate the presence of Eastern equine encephalitis virus (EEEV). Conclusions. This is the first record of natural infection from EEEV in mosquitoes from La Pintada (Antioquia), an area with ecological elements that favor the emergence of emerging and re-emerging arboviruses of medical and veterinarian importance.