Actividad antiplasmodial in vitro de Calophyllum inophyllum

Abstract

RESUMEN: Introducción: Debido a la falla terapéutica y a la resistencia de Plasmodium falciparum a varios antimaláricos existe la necesidad de buscar nuevos candidatos antimaláricos. Dado sus promisorios resultados químicos y biológicos, el género Calophyllum (Guttiferae, Clusiaceae) es de interés en el área de desarrollo de nuevos fármacos por ello, la especie Calophyllum inophyllum puede ser una alternativa para el control de la morbi-mortalidad por malaria. En este trabajo se evaluó la actividad antiplasmodial in vitro de extractos y del acido ursólico obtenidos a partir de hojas de Calophyllum inophyllum. Métodos: El material vegetal seco y molido de C. inophyllum se extrajo por percolación con solventes de diferente polaridad. A partir de los extractos se aisló mediante procesos cromatograficos, un metabolito mayoritario que fue caracterizado mediante técnicas espectroscópicas de RMN. La actividad antiplasmodial in vitro de las muestras se evaluó en la cepa resistente FCB2 de P. falciparum mediante la incorporación de hipoxantina radiomarcada y la detección de la proteína HRP-2. Resultados: Se obtuvieron cuatro extractos de diferente polaridad, se aisló y caracterizó el triterpeno acido ursólico. Se encontró que los extractos y el ácido ursólico presentan actividad antiplasmodial por ambos métodos, algunos con IC50 de 6,33 µg/mL y 13,34 µg/mL para el extracto de metanol (ExtM) y IC50 de 24,48 µg/mL y 46,28 µg/mL para el acido ursólico, con los métodos radioisotópico y HRP-2 respectivamente. Conclusiones: Se validó la actividad antiplasmodial del acido ursólico y del extracto metanólico mediante dos metodologías, sugiriendo la presencia de metabolitos activos contra el parásito, lo que estimula realizar un análisis biodirigido aislando y caracterizando más metabolitos presentes en la planta C. inophyllum.

ABSTRACT: Introduction: Currently, it is necessary to research and development new antimalarial drugs , due to treatment failure and resistance of P. falciparum to various antimalarial drugs. The genus Calophyllum (Guttiferae, Clusiaceae) is of interest because its promising results of chemical and biological activity, so Calophyllum inophyllum could be an alternative for the malaria morbidity and mortality control. This study evaluated antiplasmodial activity in vitro extracts and ursolic acid obtained from the leaves of Calophyllum inophyllum. Methods: The dried and pulverized vegetal material was extracted by percolation with different polarity solvents until exhaustion. From the extracts was isolated by chromatographic processes a major metabolite, which was characterized by NMR spectroscopic techniques. In vitro antiplasmodial activity of the samples was evaluated on continuous culture of P. falciparum strain FCB2, by HRP-2 and radioisotopic methods. Results: In this paper we obtained four extracts of different polarity, moreover was isolated and characterized a triterpene (C30H48O3 ), known as ursolic acid. We found that the extracts and ursolic acid have antiplasmodial activity by two methods evaluated, shown interesting IC50 values: 6,33 µg/mL and 13,34 µg/mL for the methanol extract (ExtM) and 46,28 µg/mL and 24,48 µg/mL for ursolic acid, by HRP-2 and radioisotopic methods, respectively. Conclusions: We report interesting antiplasmodial activity whit ursolic acid and methanol extract by both methods, suggesting the presence of active metabolites against P. falciparum, which encourages to carry out a bioguide analysis for isolating and characterization of other metabolites.