Análisis de polimorfismos en los genes tripanotión reductasa y cruzipaína en cepas colombianas de Trypanosoma cruzi

Abstract

RESUMEN: Introducción. Los estudios genéticos en Trypanosoma cruzi han buscado establecer asociaciones de variantes genéticas del parásito con manifestaciones clínicas de la enfermedad, origen biológico y geográfico de los aislamientos; sin embargo, los resultados de asociación con los marcadores comúnmente usados en estos estudios han generado mucha controversia, principalmente en la asociación de grupos con características clínicas y epidemiológicas de la enfermedad. Objetivo. Se planteó determinar la variabilidad de genes que codifican para las proteínas tripanotión reductasa y cruzipaína, involucradas en mecanismos de infección y supervivencia del parásito en el hospedador mamífero, y probar la asociación de variantes génicas con origen biológico y geográfico de cepas colombianas de T. cruzi. Materiales y métodos. Se tipificaron por reacción en cadena de la polimerasa- polimorfismo de longitud del fragmento de restricción seis SNPs (Single Nucleotide Polymorphisms) en tripanotión reductasa y ocho SNPs en cruzipaína en 36 cepas colombianas de T. cruzi de diferentes regiones y origen biológico. Resultados. Con las enzimas Acy I y Hae III se determinaron tres genotipos para tripanotión reductasa. Para cruzipaína se identificaron seis genotipos con las enzimas Rsa I, Ban I y Bsu 36I. Conclusiones. Para tripanotión reductasa no fue posible establecer una asociación con el origen biológico o geográfico; sin embargo los alelos producidos en las posiciones 102 y 210, permitieron discriminar los grupos tradicionales I y II. Con los genotipos obtenidos para cruzipaína se establecieron relaciones a estos grupos, origen biológico y geográfico. Los resultados sugieren la utilidad de estos genes como marcadores moleculares para determinar y diferenciar variedades genéticas en T. cruzi.

ABSTRACT: Introduction. Genetic studies of Trypanosoma cruzi have tried to establish relations betweengenetic variants and their biological characteristics, such as clinical manifestations, host orgeographic origin. However, much controversy exists on the associations between the commonlyused DNA markers with group, clinical characteristics and disease epidemiology.Objective. In this study determined the variability of the genes that code for the proteinstrypanothione reductase and cruzipain, both involved in the infection and survival of the parasitein the mammalian host, was studied and the association between genetic polymorphism andbiological and geographic sources in Colombian T. cruzi strains was examined.Materials and methods. The genotypes for each of six SNPs (single nucleotide polymorphisms)for trypanothione reductase and eight SNPs for cruzipain genes were identified by polymerasechain reaction-restriction fragment length polymorphism.in 36 T. cruzi Results. Three genotypes were identified for trypanothione reductase with Acy I and Hae IIIenzymes and six genotypes for cruzipain with the Rsa I, Ban I and Bsu 36I enzymes.Conclusion. For trypanothione reductase ,an association was not established with biologicalor geographical origin; however, alleles at positions 102 and 210 allowed discrimination withgroups I and II. For cruzipain, specific genotypes were associated with group, biological andgeographic origin. The usefulness of molecular markers on these genes was demonstratedfor the determination and differentiation of genetic varieties in T. cruzi