El análisis molecular y el inmunogénico sugieren la ausencia de las proteínas hidrofílicas de superficie en Leishmania (Viannia) panamensis

Abstract

RESUMEN: Introducción. Los dos subgéneros en los cuales se divide el género Leishmania: Viannia y Leishmania, presentan diferencias significativas en las manifestaciones clínicas que causan, en su comportamiento de crecimiento en cultivos in vitro, en sus características genéticas y en la expresión de varias proteínas, entre ellas las de la familia hidrofílica de superficie superficie. Objetivo. Caracterizar las proteínas hidrofílicas de superficie en Leishmania (Viannia) panamensis. Materiales y métodos. Se amplificaron los genes hasp en L. (V.) panamensis usando cebadores específicos para la especie Leishmania (Leishmania) major. Los productos de la amplificación fueron clonados, secuenciados y analizados con herramientas bioinformáticas. Posteriormente, se realizó un análisis serológico por medio de ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas y Western blot para detectar la presencia de anticuerpos específicos contra las proteínash idrofílicas recombinantes de superficie de L. (L.) major en sueros de pacientes con leishmaniasis de zonas endémicas de Colombia. Resultados. Se encontró una copia de un pseudogen en L. (V.) panamensis, el cual presentó una identidad del 60% con el gen haspa de L. (L.) major. Sólo se encontraron anticuerpos contra las proteínas recombinantes de superficie hidrofílicas en sueros de pacientes con leishmaniasis visceral. Conclusión. Estos resultados sugieren que no existe ninguna copia de un gen funcional hasp en L. (V.) panamensis, lo que indica una pérdida de la familia de genes en esta especie de Leishmania perteneciente al subgénero Viannia.

ABSTRACT: Introduction. The genus Leishmania is divided into two subgenera: Leishmania and Viannia. The two subgenera present several important differences such as the pathology they cause in susceptible hosts, their in vitro growth behavior, their genetic characteristics, and the expression pattern of several proteins, including those of the hydrophilic surface protein family. Objective. To characterize the hydrophilic surface protein family in Leishmania (Viannia) panamensis. Materials and methods. The hasp genes were amplified in L. (V.) panamensis, using specific primers previously designed to amplify this gene in Leishmania (Leishmania) major. The PCR products were cloned, sequenced, and the sequences analyzed using common bioinformatics tools. Secondly, a serological screening was undertaken with an enzyme-linked immunosorbent assay and Western blot to detect specific antibodies against the hydrophilic surface recombinant protein from L. (L.) major. Results. A copy of a pseudogene was amplified in L. (V.) panamensis which was 60% homologous with the L.(L.) major orthologous gene. Antibodies responded to the hydrophilic surface recombinant proteins only in sera from patients with visceral leishmaniasis [Leishmania (Leishmania) chagasi]. Conclusión. These results suggest the lack of a functional hasp gene in L. (V.) panamensis, suggesting probably the loss of the complete gene family in this species of the Viannia subgenus.