Estudio comparativo in vitro del potencial angiogénico de las células madre mesenquimales obtenidas de sangre menstrual, tejido adiposo y sus derivados acelulares

Abstract

RESUMEN: Las células madre mesenquimales (MSCs, por sus siglas en inglés) han sido propuestas como una opción terapéutica para enfermedades con un componente isquémico, debido a su gran potencial angiogénico con el cual favorecen a la recuperación de los tejidos lesionados, sin embargo, en las últimas décadas ha sido descrito que su secretoma o moléculas bioactivas liberadas al medio extracelular (dacs-MSCs) son las responsables en gran medida de dicho efecto. No obstante, se ha reportado que tanto las MSCs como sus dacs-MSCs presentan variabilidad en su capacidad angiogénica debido al tejido de origen, aunado a que no todas han sido caracterizadas de forma total. Por tal motivo, en esta tesis se realizó un estudio comparativo in vitro bajo las mismas condiciones experimentales entre las MSCs vs. sus dacs-MSCs para evaluar el potencial angiogénico de las células derivadas de sangre menstrual (Mens-MSCs, por sus siglas en inglés) fuente novedosa, poco invasiva que no genera eventos adversos para las donantes en la recolección del tejido y, las MSCs derivadas de tejido adiposo (AT-MSCs, por sus siglas en inglés) fuente con mayor caracterización y utilizada en estudios de angiogénesis debido a que posee un amplio efecto paracrino Las MSCs fueron caracterizadas y comparadas según su morfología, fenotipificación, potencial de diferenciación, duplicación y cinética de proliferación celular, junto con su potencial angiogénico in vitro mediante los ensayos de herida y formación tubos. Los resultados demostraron que las Mens-MSCs y las AT-MSCs son de fenotipo mesenquimal y tienen características morfológicas y de proliferación propias de su fuente de origen. En los ensayos de angiogénesis, se observó que las AT-MSCs y sus AT-dacs favorecen más el cierre de la herida y la formación de estructuras tubulares, respectivamente, demostrando que la fuente de tejido adiposo tiene mayor potencial angiogénico in vitro que la de sangre menstrual.

ABSTRACT: Mesenchymal stem cells (MSCs) have been proposed as a therapeutic option for pathologies with an ischemic component, due to their high angiogenic potential that promote the recovery of injured tissues; however, in recent decades it has been described that their secretome or bioactive molecules secreted into the extracellular medium (dacs-MSCs) are mainly responsible for this effect. However, it has been reported that both MSCs and their dacs-MSCs present variability in their angiogenic capacity according to the tissue of origin, and not all of them have been fully characterized. For this reason, in this thesis we performed an in vitro comparative study using the same experimental conditions between MSCs vs. dacs-MSCs to evaluate the angiogenic potential of menstrual blood-derived cells (Mens-MSCs), a novel, minimally invasive source that does not generate adverse events for donors during tissue collection, and adipose tissue-derived MSCs (AT-MSCs), a source with greater characterization and used in angiogenesis studies due to their a broad paracrine effect. The MSCs were characterized and compared according to their morphology, phenotype, differentiation potential, replication, and cell proliferation kinetics, along with their in vitro angiogenic potential using by wound healing and tube formation assays. The results demonstrated that Mens-MSCs and AT-MSCs possess mesenchymal phenotype and exhibit tissue specific morphological and proliferative characteristics. In angiogenesis assays, it was observed that AT-MSCs and their AT-dacs more effectively promote wound closure and tubular structure formation, respectively. This demonstrates that adipose tissues derivates has greater angiogenic potential in vitro than menstrual blood.