Análisis molecular de sonic hedgehog (shh) en la etiología de la fisura labiopalatina no sindrómica en tríos Caso-progenitores chilenos

Abstract

ABSTRACT: La identificación de desigualdades en salud es un paso hacia el análisis de inequidades, tema que preocupa a diversos actores relacionados con la salud bucal. El objetivo del presente estudio consistió en identificar la distribución de los indicadores de experiencia de caries dental por superficies en la primera infancia. Métodos: estudio descriptivo a partir de los datos obtenidos en el estudio de línea de base de indicadores de salud en 623 niños y niñas menores de seis años de edad del municipio de Andes (Antioquia) en 2015. La presencia y severidad de las lesiones de caries dental se registró según el Sistema Internacional para la Detección y Evaluación de Caries (ICDAS). Se calcularon los índices de superficies cariadas, obturadas y perdidas por caries dental (cICDAS5-6 ops y cICDAS1-6 ops), las curvas de Lorenz y los coeficientes de Gini para las frecuencias acumuladas de ambos indicadores. Resultados: se encontró un c ICDAS5-6 ops promedio de 3,3 ± 7,4, así: 3,5 ± 8,0 en la zona rural y 2,7 ± 5,7 en la urbana. El promedio del c ICDAS1-6 ops fue 14,3 ± 15,1, con diferencias estadísticamente significativas por zona de residencia: 15,7 ± 15,8 en la rural y 11,3 ± 12,8 en la urbana. El análisis de la curva de Lorenz mostró desigualdad en la distribución de la experiencia de caries. Los coeficientes de Gini fueron 0,412 para el cICDAS5-6 ops y 0,284 para el cICDAS1-6 ops. Conclusión: los análisis evidencian una distribución sesgada de la caries dental en los niños y niñas menores de seis años, y una mayor desigualdad en los indicadores de experiencia de caries dental en su forma severa en el municipio de Andes.

ABSTRACT: Introduction: identifying inequalities in health is a step towards inequity analysis, a topic that concerns various oral health stakeholders. The aim of the present study was to identify the distribution of indicators of early childhood caries experience. Methods: descriptive study based on data obtained from the baseline study on health indicators in 623 children under six years of age from the municipality of Andes (Antioquia) in 2015. The presence and severity of dental caries lesions were recorded following the International Caries Detection and Assessment System (ICDAS), calculating the indexes of decayed, missing, and filled surfaces due to caries (dICDAS5-6mfs and dICDAS1-6 mfs), as well as Lorenz curves and Gini coefficients for the accumulated frequencies of both indicators. Results: an average dICDAS5-6 mfs of 3.3 ± 7.4 was found as follows: 3.5 ± 8.0 in the rural area and 2.7 ± 5.7 in the urban area. The average dICDAS1-6 mfs was 14.3 ± 15.1, with statistically significant differences by area of residence: 15.7 ± 15.8 in the rural area and 11.3 ± 12.8 in the urban area. The analysis with Lorenz curves showed inequality in distribution of caries experience. The Gini coefficients were 0.412 for d ICDAS5-6mfs and 0.284 for dICDAS1-6mfs. Conclusion: the analyses show a skewed distribution of dental caries in children under the age of six, and a greater inequality in terms of indicators of dental caries experience in its severe form in the municipality of Andes."Nonsyndromic cleft lip and palate (NSCLP) is one of the most common congenital malformations not only in Chile but also worldwide. It has a multifactorial inheritance pattern with interaction of several genes and the environment. Several experimental studies have proven the participation of Sonic hedgedhog (Shh) in the migration process of cells from the neural crest, in the epithelium-mesenchyme transformation, and in the formation of middle craniofacial structures during embryo development; an association between Shh variants and NSCLP is probable. Methods: the goal of this study was to evaluate both exonic and intronic regions adjacent to Shh, in a sample of 150 case-parent trios in order to find possible associations with NSCLP. The PCR-RFLP method was used to determine the presence of heteroduplex. Afterwards, the Conformation Sensitive Gel Electrophoresis (CSGE) technique was used to visualize DNA distortion at the heteroduplexes. As an alternative method, a single-nucleotide polymorphism (SNP) analysis was performed in order to determine NSCLP-Shh associations, by means of these SNPs: rs1233555 and rs1233556, located at the first Shh intron. Results: no heteroduplexes were found in any of the analyzed Shh segments in 150 trios; SNP analysis did not show associations between Shh and NSCLP either.

RESUMEN: La fisura labio palatina no sindrómica, NSCLP (del inglés Nonsyndromic cleft lip and palate) es una de las malformaciones congénitas más frecuentes tanto en Chile como en el resto del mundo. Presenta un modo de herencia multifactorial, en la que interactúan varios genes y el medio ambiente. Evidencias experimentales han demostrado la participación de Sonic hedgedhog (Shh) en la migración de las células de la cresta neural, en la transformación epitelio-mesénquima y en la formación de las estructuras medias craneofaciales durante el desarrollo embrionario, es probable una asociación entre variantes de Shh y la NSCLP. Métodos: el objetivo de este trabajo fue evaluar las regiones exónicas e intrónicas adyacentes de Shh, en una muestra de 150 tríos caso-progenitores para hallar la asociación con NSCLP. Se utilizó el método PCR-RFLP para determinar la presencia de heterodúplex. Luego, se utilizó la técnica de Conformation Sensitive Gel Electrophoresis (CSGE) para ver la distorsión del ADN en los heterodúplex. Como método alternativo, se hizo un análisis de polimorfismos de un solo nucleótido (del inglés single-nucleotide polymorphism SNP) para determinar asociación entre NSCLP y Shh, para lo cual se utilizaron los SNP: rs1233555 y rs1233556, ubicados en el primer intrón de Shh. Resultados: no se observaron heterodúplex en ninguno de los segmentos de Shh analizados en 150 tríos, el análisis de SNP tampoco mostró asociación con Shh y FLPNS. Conclusión: la no asociación puede deberse a que la frecuencia de distribución de los SNP en la población chilena es diferente a la de las poblaciones referidas, o a que el número de SNP analizados fue insuficiente, o la no inclusión para el análisis de otras regiones de Shh.