Detection of macrophages infected with Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis in a cow with clinical stage IV of Johne's disease. A case report

Abstract

ABSTRACT: Anamnesis: a six-year-old milking Holstein cow (Bos taurus taurus) was diagnosed with stage IV Johne´s Disease (JD). Clinical and Laboratory findings: the cow suffered intermittent diarrhea during 6 months with no response to antibiotic treatment. Consequently, the cow was subjected to euthanasia. Treatment approach: antemortem milk and peripheral blood samples and postmortem colon, mediastinic, mesenteric lymph nodes, and spleen samples were processed for macrophages isolation. Total DNA was extracted from macrophages and used to diagnose IS900 of Mycobacterium avium paratuberculosis (MAP) through real time PCR. The MAP IS900 segment was successfully amplified from cells of all samples, indicating that these cells were MAP-infected macrophages. Conclusion: macrophages of cows suffering from JD can be used for amplification of the MAP IS900 segment.

RESUMEN: una vaca Holstein de 6 años de edad (Bos taurus taurus) presentó sintomatología de la fase IV de la enfermedad de Johne. Hallazgos clínicos y de laboratorio: la vaca presentó diarrea intermitente durante 6 meses sin respuesta al tratamiento con antibióticos. En consecuencia, la vaca fue sometida a eutanasia. Esquema de tratamiento: muestras de leche y de sangre periférica se tomaron ante-mortem; muestras de la mucosa del intestino, bazo y linfonodos mediastínico y mesentérico, se tomaron post-mortem, todas para aislamiento de macrófagos. El ADN total de los macrófagos fue usado para la amplificación del segmento IS900 de Mycobacterium avium paratuberculosis (MAP) por PCR en tiempo real. Conclusión: los macrófagos de vacas con la enfermedad de Johne pueden ser usados para la amplificación del segmento IS900 de MAP.