Caracterización de mutaciones del Virus de la Hepatitis B asociadas a resistencia al análogo de nucleósido Entecavir en pacientes colombianos sin tratamiento previo 2021 - 2023

Abstract

RESUMEN La infección crónica por el Virus de la Hepatitis B (VHB) es factor de riesgo de hepatopatías terminales. El tratamiento permite el control de la infección, pero no el aclaramiento viral y por tanto es necesario el esquema a término indefinido con la posibilidad de selección de mutaciones asociadas a resistencia. En Colombia, Entecavir es un antiviral de primera línea en el tratamiento de la Hepatitis B crónica. El objetivo de esta investigación es caracterizar las mutaciones del Virus de la Hepatitis B asociadas a resistencia a Entecavir en muestras de pacientes con hepatitis B crónica sin tratamiento previo. Se realizó un estudio descriptivo en muestras de 16 pacientes. Se amplificaron las regiones ORF S y ORF P del genoma del VHB mediante PCR anidada y tiempo real (q-PCR). Se realizó secuenciación con el método Sanger y se analizó la presencia de mutaciones con BioEdit, MEGA 11 y Geno2Pheno. En 3/16 (18,75%) de las muestras se amplifica ORF S y en 4/16 (25%) el ORF P del Virus de la Hepatitis B. Se caracterizó el genotipo F en 3 muestras y el genotipo A, en 1 muestra. No se encontraron mutaciones primarias o secundarias asociadas a resistencia a ETV. El presente estudio permitió demostrar la ausencia de mutaciones asociadas a resistencia Entecavir en muestras de pacientes sin historia de tratamiento antiviral para hepatitis B crónica. Sin embargo, se identificaron 10 cambios de aminoácidos en la región RT del ORF P en las 4 muestras secuenciadas.

ABSTRACT: Chronic infection by Hepatitis B Virus (HBV) is a risk factor for end terminal liver diseases. The antiviral treatment controls the Hepatitis B Virus infection, but not the viral clearance, thus requiring an indefinite-term regimen with the possibility of selecting mutations associated with resistance. In Colombia, Entecavir is a first-line antiviral in the treatment of chronic Hepatitis B. The aim of this research is to characterize HBV mutations associated with Entecavir resistance in samples from patients with chronic hepatitis B without prior treatment. A descriptive study was conducted on samples from 16 patients. The ORF S and ORF P regions of the HBV genome were amplified using nested PCR and real-time PCR (q-PCR). Sequencing was performed using the Sanger method, and the presence of mutations was analyzed using BioEdit, MEGA 11, and Geno2Pheno. In 3/16 (18, 75%) of the samples, ORF S was amplified, and in 4/16 (25%) of the samples, ORF P of the Hepatitis B Virus was amplified. Genotype F was characterized in 3 samples and genotype A in 1 sample. No primary or secondary mutations associated with resistance to ETV were found. This study demonstrated the absence of Entecavir resistance associated mutations in samples from patients without a history of antiviral treatment for chronic hepatitis B. However, 10 amino acid changes were identified in the RT region of the P ORF in the 4 sequenced samples.