Enzymatic dissociation of long muscles from mice : a model for the study of skeletal muscle fiber types

Abstract

ABSTRACT: The enzymatic dissociation of short muscles from mice, such as flexor digitorum brevis, has allowed a great accumulation of physiological, pharmacological and biochemical knowledge about skeletal muscle. However, this body of knowledge has been restricted to the types of fibers present in these muscles. Information about the other fiber types has been limited and has been primarily obtained by the manual isolation of fibers from other species, typically rats, via a difficult and time-consuming procedure. In this report, the author describes a technique for the enzymatic dissociation of long muscles, such as soleus or extensor digitorum longus (EDL), which can be applied to study a wider spectrum of fiber types and larger quantities of cells. Additionally, the kinetics of Ca2+ transients obtained in soleus and EDL fibers are compared in this report. The usefulness of this methodology for other physiological, biochemical and molecular biology experiments is also discussed. This methodology introduces the possibility of using the whole spectrum of fiber types to study normal muscle biology and the pathophysiology of muscle diseases.

RESUMEN: La disociación enzimática de músculos cortos de ratón, como el flexor digitorum brevis, ha permitido la acumulación de gran cantidad de información fisiológica, farmacológica y bioquímica sobre el músculo esquelético, la cual, sin embargo, ha estado limitada a los tipos de fibras presentes en estos músculos. La acumulación de información sobre los demás tipos de fibras ha sido escasa y se ha logrado mediante el aislamiento manual de fibras en otras especies, clásicamente en ratas: un procedimiento difícil y que toma mucho tiempo. En este trabajo se presenta una descripción de la técnica que permite la disociación enzimática de músculos largos de ratón como el soleus o el extensor digitorum longus (EDL), lo cual aumenta el espectro de tipos de fibras y el número de ellas disponibles para el estudio de los fenómenos biológicos en el músculo esquelético. Además se compara la cinética de los transitorios de Ca2+ en fibras de soleus y EDL y se prueba la utilidad del modelo en otros experimentos que utilizan técnicas de fisiología, bioquímica y biología celular. Esto abre la posibilidad de utilizar todo el espectro de fibras musculares para estudiar la biología muscular y la fisiopatología de las enfermedades musculares.