Medición de estrés oxidativo en el hongo Histoplasma spp : técnicas in vitro para un rápido análisis de mutantes

Abstract

RESUMEN: Las reacciones de óxido-reducción son fundamentales para la elaboración de diferentes procesos celulares, generalmente aerobios. Se basan en el intercambio de electrones, donde por diferentes rutas del metabolismo se da la producción de moléculas denominadas ERO, las cuales presentan una característica de inestabilidad teniendo la capacidad de reaccionar con cualquier otra molécula alterando su estructura y su funcionalidad. Las células como mecanismo de defensa han desarrollado estrategias enzimáticas que contrarrestan específicamente este efecto. En este estudio, se evaluaron diferentes técnicas in vitro para medir el efecto de estrés oxidativo causado por sustancias como H2O2 y menadiona, utilizando cepas de Histoplasma spp. con un silenciamiento génico para las enzimas SOD3 y CATp. Se encontró que estos ensayos no son concluyentes para la medición del estrés oxidativo en este modelo biológico ya que no se obtuvieron los resultados esperados. Además se puede sugerir que al no verse mayormente afectadas las células silenciadas en comparación con el control estas utilizan vías alternas para regular el efecto de las ERO.

ABSTRACT : The oxidation-reduction reactions are fundamental in different cellular processes, communly aerobic process. They are based on the exchange of electrons, where the production of molecules called ROS occurs through different pathways of metabolism, which presents a characteristic of instability. They have the ability to react with any other molecules, altering its structure and functionality. Cells as a defense mechanism have developed enzymatic strategies that specifically counteract this effect. In this study, different in vitro techniques were evaluated to measure the effect of oxidative stress caused by substances such as H2O2 and menadione, using strains of Histoplasma spp. with a gene knock down for the enzymes SOD3 and CATp. It was found that these tests are not conclusive for the measurement of oxidative stress in this biological model since the expected results were not obtained. In addition, it can be suggested that as the silenced cells are not affected more than the control cells, they use alternative pathways to regulate the effect of ROS.